Разработка методики одновременного определения каротиноидов (β-каротина, лютеина, зеаксантина) и витамина Е в биологически активных добавках методом ВЭЖХ
Вы здесь
Аннотация:
Разработана методика одновременного определения содержания бета-каротина, лютеина, зеаксантина и витамина Е в биологически активных добавках. Метод основан на щелочном гидролизе продукта, экстракции, очистке экстрактов и одновременном количественном определении с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с диодно-матричным детектором. Хроматографическое разделение осуществлялось на обращенно-фазной колонке С18 (HyperClone ODS(C18) 120 A, 250 х 4,0 мм, 5,0 мкм). В качестве подвижной фазы использовали смесь ацетонитрил: 0,06 % раствор NaOH в метаноле. Элюирование проводили в градиентном режиме. Предел количественного определения для каротиноидов составляет 0,2 мг/кг, а для витамина Е – 2,0 мг/кг.
Ключевые слова:
бета-каротин, лютеин, зеаксантин, витамин Е, ВЭЖХ, биологически активные добавки
обновлено: 26.05.2022
Комментарии - 5
Уважаемая Екатерина Владимировна, благодарю за интересный доклад.
Скажите, пожалуйста, исходя из каких параметров была подобрана подвижная фаза для элюирования целевых компонентов? Какие растворители использованы для приготовления стандартных растворов Витамина Е и каротиноидов для построения градуировки?
Добрый день, Мария Олеговна! Большое спасибо за проявленный интерес к работе и за поставленные Вами вопросы. Подвижная фаза для элюирования целевых компонентов была подобрана исходя из таких параметров, как достижение наиболее приемлемого времени удерживания аналитов, а также наличие полного хроматографического разделения всех целевых веществ (коэффициент селективности α≥1 (фактор разделения), разрешение пиков R>1 (степень разделения)). В частности, наличие в составе подвижной фазы раствора NaOH в метаноле обусловлено тем, что оптимального разделения пиков зеаксантина и лютеина, которые являются структурными изомерами, имеющими одну и ту же общую формулу, удается только в щелочной среде. Для приготовления стандартных растворов Витамина Е и каротиноидов для построения градуировки использован этанол, как и для растворения проб образцов перед их исследованием.
Благодарю за ответ, Екатерина Владимировна!
Добрый день, Екатерина Владимировна! спасибо за интересный доклад!
Как можно объяснить, что степени извлечения в некоторых случаях более 100 %?
Планируете ли проводить метрологическую аттестацию методики?
Добрый день, Ксения Олеговна! Большое спасибо за интерес к работе и за Ваши вопросы.
Степени извлечения в некоторых случаях могут быть более 100 %, это обусловлено тем, что все погрешности измерений на всех этапах анализа могут сказываться на конечном результате как в сторону уменьшения количественного значения, так и в сторону увеличения. В данном случае главное, чтобы полученное в ходе анализа значение входило в доверительный интервал значений, который задает расширенная неопределенность методики. Метрологические характеристики данной методики уже рассчитаны, они будут темой дальнейших публикаций, даже самая большая степень извлечения, 106.7%, по числовому значению входит в доверительный интервал значений, в пределах которого результат считается истинным.
В дальнейшем планируется проведение метрологической аттестации данной методики.